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采用TSKgel G5000PWXL 分離重組SARS-CoV-2 S蛋白
發布時間：
2022-10-20 11:15
*重組SARS-CoV-2 S蛋白（Recombinant SARS-CoV-2 S proteins）
【基本信息】
SARS-CoV-2屬于冠狀病毒科、β冠狀病毒屬，是一種球形、有包膜的單正鏈RNA病毒。主要編碼4種結構蛋白：刺突糖蛋白（spike glycoprotein，S蛋白）、包膜蛋白（envelope protein，E蛋白）、膜蛋白（membrane protein，M蛋白）、核衣殼蛋白（nucleocapsid protein，N蛋白）。S蛋白是新型冠狀病毒最重要的表面蛋白，是中和病毒感染抗體的主要靶點，也是疫苗設計的核心免疫原成分。S蛋白由S1和S2亞基組成，其中白受體結合域（RBD）位于S1亞基。這里對昆蟲細胞中表達并純化得到的了重組SARS-CoV-2 S蛋白及片段S1蛋白和RBD蛋白進行了高效尺寸排阻色譜（HPSEC）的分離和表征。
【樣品制備】
重組SARS-CoV-2 S 蛋白及片段S1蛋白、RBD蛋白參考方法[1]制備。
【分析條件】
色譜柱：TSKgel G5000PWXL（I.D.7.8 mm×30 cm，10 μm）
流動相：10 mM PB（pH 7.4）
流速：0.5 mL/min
柱溫：室溫
檢測器參數：UV @280 nm
樣品：重組S蛋白及S1蛋白、RBD蛋白
圖1純化后重組S蛋白及S1蛋白、RBD蛋白分離色譜圖
【結果與討論】
采用高效凝膠色譜TSKgel G5000PWXL對純化后重組SARS-CoV-2 S 蛋白及片段RBD、S1溶液進行了分離。實驗結果表明：該色譜柱可有效實現純化后重組SARS-CoV-2 S蛋白、S1蛋白及RBD蛋白的分離。RBD、S1和S在洗脫體積分別為9.0 mL、5.5 mL和5.3 mL的HPSEC譜圖上均顯示一個主峰（見圖1）。
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